RSS подписка
Реклама

 

Спиртовым брожением называется процесс разложения сахара под действием микроорганизмов на этиловый спирт и углекислый газ. Суммарное уравнение спиртового брожения:

С6Н12О6 ® 2СН3СН2ОН + 2СО2.

Спиртовое брожение лежит в основе виноделия, пивоварения, хлебопечения.

Постановка опыта. Для изучения спиртового брожения пользуются синтетической средой следующего состава, г: сахароза (или глюкоза) – 15,0; дрожжи – 0,5; КН2РО4 – 0,3;MgSО4 – 0,1; вода дистиллированная – 100 мл. В колбу вносят дрожжи, добавляют часть отмеренной цилиндром воды и тщательно взбалтывают для лучшего растворения, а затем прибавляют все по рецепту. Колбу закрывают пробкой, в которую вставлена изогнутая трубочка. В открытый конец трубки капают серную кислоту, а затем закрывают его фольгой. В результате этого из колбы будет легко выходить выделяющийся при брожении углекислый газ, но задерживаться пары воды.

Колбу взвешивают на технических весах с точностью до 0,01 г, прикрепляют этикетку, на которой указывают массу колбы, номер группы, факультет и фамилию исполнителя, и помещают в термостат при температуре  25 ºС.

Элективные условия для прохождения спиртового брожения:

1)   высокая концентрация сахара;

2) присутствие в опыте дрожжей – возбудителей спиртового брожения;

3)  анаэробные условия;

Автор: Admin | Добавлено: 28-12-2011, 20:43 | Комментариев (0)
Агрономия » Ботаника и физиология растений » МИКРОБИОЛОГИЯ » ПРЕВРАЩЕНИЕ МИКРООРГАНИЗМАМИ СОЕДИНЕНИЙ УГЛЕРОДА

Углерод является одним из важнейших элементов, он входит в состав органических веществ. В природе происходит круговорот углерода. Растения строят органическое вещество из углекислого газа атмосферы, превращая лучистую энергию солнца в скрытую энергию химических связей (осуществляют фотосинтез). Только небольшая часть бактерий может использовать солнечную энергию (фотолитоавтотрофы) или энергию окисления неорганических веществ (хемолитоавтотрофы) для самостоятельного синтеза органических веществ из углекислоты.

В воздухе содержится 0,03 % СО2. Атмосфера пополняется углекислым газом при вулканических извержениях, сжигании топлива, в результате дыхания людей, животных, растений и микроорганизмов. Почвенная микрофлора разлагает органические вещества, осуществляя минерализацию растительных и животных остатков до углекислого газа. Микробы получают энергию в основном при освобождении ее из безазотистых органических веществ. Различают две формы катаболизма (энергетического обмена): брожение – без доступа свободного кислорода и дыхание, или окисление – с кислородом. При дыхании энергия освобождается полностью и конечными продуктами явялются СО2 и Н2О.

Брожение – это разложение органических безазотистых веществ без доступа кислорода с выделением энергии и образованием продуктов, которые дальше в среде без кислорода не разлагаются. Название брожения дается по конечным продуктам (спиртовое, маслянокислое, молочнокислое и др.).

Автор: Admin | Добавлено: 28-12-2011, 20:41 | Комментариев (0)
Агрономия » Ботаника и физиология растений » МИКРОБИОЛОГИЯ » Определение вида микроорганизма

Конечная цель микробиологического исследования – определение вида выделенного микроорганизма. Для того, чтобы это сделать, необходимо знать:

1) культуральные признаки колонии (только по внешнему виду колоний на МПА можно легко идентифицировать некоторые микроорганизмы, например, Bacillus mycoidesобразует ветвистые стелящиеся по мясопептонному агару колонии, напоминающие мицелий гриба);

2) морфологические признаки микроорганизмов (по культуральным и морфологическим признакам, часто можно определить лишь род микробов);

 3) биохимические признаки - отношение к различным источникам питательных веществ – углеводам, белкам, жирам и др. (для этого чистую культуру пересевают на «пёстрый ряд» различных сред с индикаторами) и физиологические признаки – отношение к кислороду, температуре и кислотности среды.

Используя полученную информацию и пользуясь определителем для бактерий, устанавливают род и вид  выделенного в чистой культуре микроорганизма.

Автор: Admin | Добавлено: 28-12-2011, 20:40 | Комментариев (0)

Почва является благоприятной средой для развития микроорганизмов, она обильно населена ими и является основным источником распространения микробов. В почве есть всё необходимое для жизнедеятельности микроорганизмов – органические и минеральные вещества, влага, здесь они защищены от губительных ультрафиолетовых лучей солнца. Количество микробов в почве и их видовой состав зависят от различных почвенно-климатических факторов – механического состава почвы, её влагоёмкости, кислотности вида, обработки, времени года и др.

В почве много палочковидных бактерий, актиномицетов, плесневых грибов.

Посев микроорганизмов из почвы. Для определения количества микроорганизмов в 1 г почвы применяют метод питательных агаровых пластинок – поверхностный посев на МПА в чашках Петри, используя предварительное разведение. Из средней пробы исследуемой почвы в день анализа берут навеску 1 г и переносят её в колбу со 100 мл стерильной воды. Колбу взбалтывают 10 мин и дают 1 мин отстояться, получают разведение 1:100 (в 1 мл воды находится 0,01 г почвы). Готовят 4 пробирки с 9 мл воды в каждой и заранее стерилизуют их в автоклаве. Из колбы пипеткой набирают 1 мл почвенной суспензии и переносят в пробирку № 1, раствор при этом разбавляется в десять раз (разведение 1:1000). Другой пипеткой продувают полученную смесь для равномерного перемешивания, затем набирают 1 мл и переносят в пробирку № 2, получая при этом десятикратное разведение предыдущего раствора (1:10 000). Новой пипеткой сначала продувают полученный почвенный раствор, а потом набирают 1 мл и переносят в пробирку № 3 (разведение 1: 100 000). Затем, поступая аналогично, переносят   1 мл    из      пробирки  № 3 в   пробирку № 4  (разведение

1:1 000 000), а из неё набирают градуированной пипеткой и переносят на поверхность МПА в чашке Петри 0,1 мл (разведение 1:10 000 000). Стерильным стеклянным шпателем почвенную суспензию растирают лёгкими круговыми движениями досуха по поверхности среды, не повреждая её при этом. 

Автор: Admin | Добавлено: 28-12-2011, 20:39 | Комментариев (0)

Воздух – неблагоприятная среда для микроорганизмов. Он не является средой постоянного обитания, а только временного нахождения или переноса микроорганизмов. В воздухе нет питательных веществ, постоянной оптимальной температуры, часто отсутствует влага, губительно действуют на микробы солнечные лучи. Микроорганизмы попадают в воздух главным образом с пылью или каплями жидкости с поверхности почвы, растений, животных, транспорта, водной поверхности. Микробы в воздухе распространены неравномерно. Количественный и качественный состав микрофлоры воздуха находится в прямой зависимости от микрофлоры почвы, над которой берут пробу воздуха. Количество микроорганизмов зависит от погоды (в дождливую их меньше, чем в сухую), от времени года (летом их больше, чем зимой) и места взятия пробы (над крупными населенными пунктами микробов больше, чем над сельской местностью). Микроорганизмов мало в воздухе над лесами, садами, лугами, озёрами, океаном, высоко в горах и на севере.

Микрофлора воздуха характеризуется наличием большого количества шаровидных бактерий (микрококков, диплококков, сарцин, стафилококков), устойчивых к недостатку влаги и ультрафиолетовым лучам и образующих разноцветные пигментированные колонии на питательной среде, встречаются также палочковидные формы и плесневые грибы.

За сутки через легкие человека проходит 12-14 тыс. литров воздуха. Воздушным путем распространяются возбудители гриппа, туберкулёза, оспы, пневмонии, коклюша, ангины, катара верхних дыхательных путей и др.

Посев микроорганизмов из воздуха. Наиболее простым способом определения общего количества микроорганизмов в воздухе является метод оседания микробов на агаровую пластинку, предложенный Р. Кохом. Метод заключается в том, что чашку Петри с мясопептонным   агаром    открывают  в  исследуемом  помещении на 5 мин, после чего закрывают крышкой, оборачивают бумагой, переворачивают вверх дном во избежание размыва колоний конденсационной водой, подписывают и помещают в термостат при 28-30 ºС для выращивания микробов, которые оседают на питательную среду вместе с пылью. По количеству выросших колоний можно судить о степени загрязненности воздуха микроорганизмами.

Автор: Admin | Добавлено: 28-12-2011, 20:38 | Комментариев (0)

Холодные способы стерилизации включают различные приемы уничтожения микроорганизмов. Называют их холодными условно, чтобы подчеркнуть, что они не основываются на действии высоких температур. При этом нужно помнить, что низкие отрицательные температуры не убивают, а только задерживают рост и развитие микроорганизмов.

К холодной стерилизации относятся:

1. Химическая стерилизация, или дезинфекция – это уничтожение патогенных (болезнетворных) микроорганизмов с помощью химически ядовитых веществ (антисептиков). Метод используют в медицине. К антисептикам, или дезинфицирующим средствам относятся мыла, красители (зелёнка), соли тяжёлых металлов, окислители (хлор, йод, перекись водорода, перманганат калия), формалин , формальдегиды, спирты и др.

2. Физические методы стерилизации: стерилизация ультрафиолетовыми лучами (УФ) – используют при кварцевании, ультразвуком (УЗ), током ультравысокой частоты (УВЧ) и др. Эти приемы широко используют в медицине.

3. Стерилизация фильтрованием. Механическое освобождение от микроорганизмов путем фильтрации различных жидких сред через фильтры, задерживающие микробы. К таким мелкопористым фильтрам, у которых размеры пор меньше размеров бактерий, относятся фильтры Шамберлана из каолина, пластинчатые асбестовые фильтры  Зейтца, мембранные фильтры из нитроцеллюлозы. Их используют для обработки легко портящихся от нагревания жидкостей.

Фильтры Шамберлана называют фильтровальными свечами, потому что они представляют собой высокие полые цилиндры из высококачественной мелкопористой глины – каолина. В горлышко колбы с носиком вставляют резиновую пробку с отверстием, куда устанавливают свечу. Стерилизуют аппарат в автоклаве. Место соприкосновения свечи и пробки заливают парафином. На носик колбы надевают резиновую трубку и подсоединяют к насосу.

Автор: Admin | Добавлено: 28-12-2011, 20:37 | Комментариев (0)
Агрономия » Ботаника и физиология растений » МИКРОБИОЛОГИЯ » Способы термической стерилизации:

1. Фламбирование (от лат. flamma – пламя и фр. flambé – гореть)– стерилизация путем прокаливания в пламени мелких металлических или стеклянных предметов. Таким способом стерилизуют бактериологические петли, металлические пинцеты, стеклянные шпатели и трубочки, предметные стекла и др. Температура пламени около 1000ºС. При прокаливании сгорают все микроорганизмы (вегетативные и споровые формы). Это быстрый и надежный способ стерилизации.

2. Кипячение. Является одним из самых простых способов стерилизации. Проводится в стерилизаторе – металлической прямоугольной коробке с крышкой и сеткой на дне для укладывания стерилизуемых предметов. Наливают в него воду и нагревают до кипения (нагрев электрический или на огне). Кипячение может длиться  от 15-30 мин до 2 ч при температуре около 100 ºС. Стерилизуют мелкие металлические или стеклянные предметы – шприцы, иглы, стеклянные трубки и др. При этом погибают вегетативные формы микроорганизмов и часть спор. Практикуют также ошпаривание кипятком стерилизуемого материала.

3. Стерилизация сухим жаром. Производится горячим воздухом в печи Пастера или сушильном шкафу. Печь Пастера представляет собой шкаф с двойными стенками, покрытый снаружи асбестом для теплоизоляции. Внутри шкафа устроены металлические полки с отверстиями, на которые помещают стерилизуемый материал. Нагрев электрический. Стерилизация проводится при температуре 160-180 ºС в течение 1-2 ч с момента достижения этих температур (контроли-руется по термометру). Стерилизуют сухим жаром главным образом стеклянную посуду – чашки Петри, пипетки, шпатели (обернутые в бумагу), а также пробирки, колбы.  Этот прием надежный – погибают неспоровые и споровые формы микроорганизмов. Обернутый в бумагу и простерилизованный материал можно хранить.

4. Стерилизация текучим паром. Проводится горячим влажным воздухом в аппарате Коха. Аппарат (кипятильник) Коха представляет собой металлический цилиндр, который может быть на ножках и покрыт линолеумом. В аппарат наливают столько воды, чтобы она не доходила до выступа, на который помещают металлический кружок с отверстиями и сверху на него стерилизуемый материал.

Автор: Admin | Добавлено: 28-12-2011, 20:36 | Комментариев (0)

Термическая (горячая) стерилизация основана на уничтожении микробов с помощью высоких температур. Это легко выполнить и широко используется в практической деятельности человека. При этом нужно помнить, что у вегетативных (неспоровых) клеток денатурация белков и гибель клеток начинается уже при температуре 56-60 ºС. Более термоустойчивые споры погибают в сухой атмосфере при температуре 160 ºС в течение 1-2 ч, а во влажной среде гибель происходит при температуре 112-120 ºС в течение 20-30 мин.

Автор: Admin | Добавлено: 28-12-2011, 20:35 | Комментариев (0)
Агрономия » Ботаника и физиология растений » МИКРОБИОЛОГИЯ » Приготовление ряда питательных сред

Мясопептонный бульон (МПБ) – среда искусственная, жидкая, общего назначения. Для её приготовления используют мясо – говядину, телятину, конину и др. Из мяса получают фарш, заливают его холодной водопроводной водой (на 1 кг фарша 2 л воды), настаивают при температуре 5-7 ºС 18-24 ч для выделения экстрактивных веществ. Затем мясной настой кипятят 15-30 мин, охлаждают и фильтруют через полотно. К 1 л полученного бульона добавляют 5 г NaCl и 10 г пептона. Сухой пептон представляет собой жёлтый липкий порошок – продукт неполного распада белков. Соль и пептон растворяют при нагревании, доводят щелочью рН до 7,2-7,4 (слабощелочная реакция среды благоприятна для большинства микроорганизмов). Среду разливают в колбы и стерилизуют в автоклаве. Используют для приготовления МПА и МПЖ, для накопительной культуры аммонифицирующих бактерий.

Мясопептонный агар (МПА) – среда искусственная, твёрдая, общего назначения. Представляет собой плотную студнеобразную массу. Эта питательная среда широко применяется в лабораторной практике для выращивания микроорганизмов. Для её приготовления используют сухой агар-агар (по малайски агар-агар – желе) – полисахарид с низким содержанием азотистых веществ и не представляющий питательной ценности для микроорганизмов. Агар-агар имеет вид серых листовидных пластинок. Добывается он из морских водорослей багрянок. Это отличное гелеобразующее вещество – обладает способностью набухать и растворяться при нагревании, а после застывания образовывать плотную студенистую массу. Для приготовления этой среды к 1 л  МПБ добавляют 15-20 г агар-агара. Замачивают несколько часов для набухания агара, кипятят на слабом огне до полного его растворения, после этого доводят объём жидкости до первоначального дистиллированной водой, фильтруют через марлевый фильтр, смоченный предварительно горячей водой. Среду в горячем виде разливают в стеклянные колбы и стерилизуют в автоклаве. Готовый МПА имеет точку плавления 96-100 ºС и температуру застывания около 40 ºС, т. е. при комнатной температуре он всегда представляет собой твердую питательную среду. Используют для количественного анализа микрофлоры воздуха и почвы.

Автор: Admin | Добавлено: 28-12-2011, 20:33 | Комментариев (0)
Агрономия » Ботаника и физиология растений » МИКРОБИОЛОГИЯ » Исследование микроорганизмов в живом виде
Для наблюдения за движением, питанием, размножением, действием различных веществ на микроорганизмы необходимо исследовать живые клетки. Для этого готовят нефиксированные и неокрашенные препараты двумя способами: «раздавленной» и «висячей» капли.
В живом виде исследуют плесневые грибы, которые образуют налёт (пушок) на поверхности различных субстратов, например хлеба. Плесени состоят из разветвлённых гифов, составляющих мицелий. Они достаточно крупные, чтобы их можно было рассматривать даже при малом увеличении, кроме того, плохо красятся.
Автор: Admin | Добавлено: 28-12-2011, 20:31 | Комментариев (0)